刘天佳
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：河北科技大学更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法
- 本发明公开了在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法，通过分析5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的限速步骤、中间体供给及产物分泌等问题，克隆<i>Rhodobacter？sphaeroi...
- 冯惠勇刘天佳李天明戴宝新刘静文
- 文献传递
- 在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法
- 本发明公开了在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法，通过分析5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的限速步骤、中间体供给及产物分泌等问题，克隆<I>Rhodobactersphaeroides</I>...
- 冯惠勇刘天佳李天明戴宝新刘静文
- 文献传递
- 过量合成5-氨基乙酰丙酸工程菌的构建
- 5-氨基乙酰丙酸(5-aminolewlinicacidALA)是一种光动力化合物。在医学上，ALA用于癌症的光动力学治疗和诊断，具有促进血红素生成的作用，是痤疮治疗的外用药，并且可以作为生发剂使用;在农业上，ALA是一...
- 刘天佳
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸生物合成代谢工程大肠杆菌基因克隆
- 文献传递
- 木质素降解酶系在毕赤酵母中的表达及降解木质素的活性被引量：4
- 2015年
- 自然界中的木质素是潜在的丰富的可再生资源,近年来利用生物法降解木质素成为研究的热点。利用RT-PCR克隆了黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)木质素过氧化物酶基因(Li P)、锰过氧化物酶基因(Mn P)、黑曲霉(Asperillus niger)葡萄糖氧化酶基因(gox)及白腐真菌(White Rot Fungi)漆酶基因(Lac),并构建了毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体,电转化入Pichia pastoris X-33宿主菌中,获得转化子并进行微培养,通过测定培养液的酶活,筛选出高酶活菌株。对4种重组菌株进行发酵,以经过处理的玉米皮作为底物,分别加入4种酶的发酵液及4种酶的混合液,于30℃反应后测定不同反应时间木质素的降解量,反应24h,木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶、葡萄糖氧化物酶、漆酶吸光度D280nm的降低幅度分别为45%、39%、9%、57%;复合酶降解木质素的活性明显高于单一酶,吸光度的降低幅度为78%,说明木质素降解酶系的相互协同作用,提高了木质素的降解效率,为木质素酶解提供了新方法。
- 刘金雷刘天佳于莹李天明仪宏
- 关键词：木质素异源表达毕赤酵母酶活性
- 利用TAIL-PCR克隆Gluconobacter suboxydans葡萄糖脱氢酶基因及其生物信息学分析被引量：3
- 2014年
- 以Gluconobacter suboxydans J菌株基因组DNA为模板，基于吡咯喹啉醌附着位点的保守区域设计引物，通过交错式热不对称PCR获得编码葡萄糖脱氢酶（glucose dehydrogenase，GDH）的全长基因（gdh），并对其序列进行生物信息学分析。结果表明：gdh基因全长2 268 bp，编码755个氨基酸，其蛋白序列与Gluconobacter属的GDH具有较高的同源性。GDH的分子质量约为81.72 ku，pI值约为5.14；GDH蛋白的二级结构由18.41%的α-螺旋、16.16%的延伸和65.43%的无规则卷曲3种结构模块组成；GDH N末端的AA 1～140区域有5个跨膜结构域。
- 戴宝新冯惠勇李天明刘天佳刘静文仪宏
- 关键词：葡萄糖酸葡萄糖脱氢酶生物信息学
- Pseudom onas sp.101甲酸脱氢酶基因的合成、表达及定点饱和突变被引量：1
- 2013年
- 甲酸脱氢酶(FDH)是氧化还原酶辅酶NAD+和NADH再生循环体系中的关键酶,具有重要的应用价值和产业化应用前景。通过采用重叠延伸PCR技术,人工合成编码FDH的基因fdh,构建原核表达载体pET30a-fdh,以E.coliBL21(DE3)为表达宿主,获得了能可溶性表达的甲酸脱氢酶的重组菌;经16℃IPTG诱导表达,重组酶的比活力为8.7 U/mgPro;为了提高FDH的稳定性,采用融合PCR方法对fdh基因进行了定点饱和突变,经筛选,获得了酶活未变但稳定性有所提高的突变酶Cys146AlaCys354Ala,其稳定性比野生酶提高了2.5倍。
- 李天明朱灵桓刘天佳戴宝新冯惠勇
- 关键词：甲酸脱氢酶基因合成原核表达
