肖璐
- 作品数:23 被引量:79H指数:5
- 供职机构:四川农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 环介导等温扩增技术及其应用被引量:14
- 2015年
- 环介导等温扩增(LAMP)技术于2000年由日本学者提出,其反应原理是由两对特异性引物,针对靶基因的6个不同区域进行特异性识别,在DNA聚合酶作用下,恒温条件进行链置换扩增。由于LAMP技术具有高灵敏度、强特异性、快速简便、成本低廉等特点,使得其广泛应用于病原菌的检测、胚胎性别鉴定、食品卫生检验等方面。论文针对LAMP技术的研究背景、反应原理、应用等方面进行了综述,总结出不同因素对LAMP反应的影响,对其优势和局限性进行了讨论,并对LAMP的发展前景进行了展望。
- 肖璐邬旭龙王印杨泽晓姚学萍
- 关键词:环介导等温扩增病原检测
- 一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法
- 本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法,包括LAMP最佳反应体系为25μL:1μL8UBstDNA聚合酶,2.5μL10×ThermoPolbuffer缓冲液,6μL2.5mMeachdNTPs,4μL...
- 王印邬旭龙杨泽晓姚学萍张鹏飞姜睿姣肖璐张博刘亚东冷伊依胡凌林星宇曾相杰罗忠永任梅渗蒙正群
- 文献传递
- 靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量:7
- 2016年
- 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了常规多重PCR扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点,实现了对同一反应体系多种病原的同步检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对Tem–PCR的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述,旨在为Tem–PCR的研究和发展提供参考依据,为中国应对公共卫生危机提供新思路。
- 邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博
- 关键词:高通量生物技术公共卫生
- 发展一种新型高通量生物检测技术(靶序列富集多重PCR)及其应用
- 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序...
- 邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博
- 关键词:高通量生物技术公共卫生
- 猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及荚膜血清分型被引量:13
- 2016年
- 为了解各血清型的多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)在四川、重庆、云南的流行情况,对2013—2014年间四川、重庆、云南等地8个规模化养殖场的125份病死猪肺炎样品进行细菌分离,并用PCR方法对分离的多杀性巴氏杆菌进行鉴定及荚膜血清分型。结果表明:从有肺炎症状病死猪的肺脏样品中共分离出11株多杀性巴氏杆菌,其中有7株为A血清型(63.6%),3株为D血清型(27.3%),1株为F血清型(9.1%),没有发现B和E血清型。表明在该区域内,猪肺疫主要是由A型Pm感染引起。另外,此次还分离出了1株较少见的F型多杀性巴氏杆菌。该结果可为上述地区巴氏杆菌病的防治提供科学材料。
- 林星宇胡凌王印杨泽晓姚学萍肖璐任梅渗曾相杰
- 关键词:多杀性巴氏杆菌血清分型
- 副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立被引量:10
- 2019年
- 为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的Omp P2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法。该方法能够特异性地检测Hps和Pm,其对重组质粒标准品的最低检测浓度分别为5.60×10^2拷贝/μL、7.58×10^2拷贝/μL。双重与单一荧光定量PCR最低检测限相同,且均是常规PCR的100倍。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于2.5%。临床应用结果显示:该方法对阳性样品的检出率为53.57%,明显优于常规PCR和细菌分离鉴定。该方法能够用于两种疾病的同时检测和快速排查疾病。为两种疾病的防治提供有效检测工具。
- 姜睿姣周丽军邬旭龙张鹏飞罗梓丹肖璐王印姚学萍杨泽晓罗燕
- 关键词:副猪嗜血杆菌巴氏杆菌
- 基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法
- 本发明公开了一种基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法,依据靶序列富集多重PCR,采用4对特异性的套式PCR引物和探针,并在各内引物的5’端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列。本发明克服了传统PCR方法的...
- 王印彭善珍杨泽晓姚学萍邬旭龙张鹏飞冷伊依肖璐任梅渗曾相杰罗忠永胡凌林星宇张博刘亚东蒙正群李桂黎王波
- 文献传递
- 一种检测猪繁殖障碍病毒的多重GeXP-PCR方法
- 本发明公开了一种检测猪繁殖障碍病毒的多重GeXP‑PCR方法,采用含7种猪繁殖障碍病毒靶基因的PRV,ASFV,PPV,PRRSV,CSFV,PCV2,JEV嵌合引物和通用引物以适当配比参加PCR反应,PRV,ASFV,...
- 王印胡凌杨泽晓姚学萍林星宇邬旭龙李桂黎任梅渗肖璐张鹏飞曾相杰冷伊依
- 文献传递
- 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其皮肤坏死素(DNT)粗提液的小鼠皮肤毒性试验
- 为更好地进行波氏菌病的防治,利用分离培养、生化实验、PCR鉴定和同源性分析对采自四川某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔拭子进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定,参考经典的皮肤坏死素(DNT)粗提技术,将分离株DNT粗提...
- 肖璐邬旭龙王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博刘亚东
- 关键词:支气管败血波氏杆菌皮肤毒性
- 猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其皮肤坏死素(DNT)粗提液的小鼠皮肤毒性试验被引量:5
- 2016年
- 为更好地进行波氏菌病的防治,利用分离培养、生化实验、PCR鉴定和同源性分析对采自四川某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔拭子进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定,参考经典的皮肤坏死素(DNT)粗提技术,将分离株DNT粗提原液及10和100倍稀释物分别注射于4-5、15-20和40-45d3组不同日龄的SPF鼠,进行毒力检测。结果分离到一株支气管败血波氏杆菌,其DNT毒力较强,0.2mL粗提原液可造成4-5d乳鼠皮下组织发生严重急性出血性炎症而死亡;15-20d乳鼠皮下出血,毛囊损伤,表皮层细胞结构模糊、紊乱,耐过乳鼠损伤处皮肤毛发生长受损;40-45d小鼠脱毛等轻微症状。本试验分离菌株皮肤毒性较强,DNT对不同日龄鼠的皮肤致病力有差异,可引起表皮层、真皮层和皮下组织同时损伤。
- 肖璐邬旭龙王印杨泽晓姚学萍胡凌林星宇任梅渗罗忠永曾相杰
- 关键词:支气管败血波氏杆菌皮肤毒性