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孙森森
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
河南省肿瘤病理重点实验室
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发文基金:
河南省高校杰出科研人才创新工程基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李继昌
郑州大学第一附属医院
樊文辉
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田力
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陈奎生
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2007
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基质金属蛋白酶抑制因子-1小干扰RNA载体构建及对肝星状细胞沉默效应的研究
被引量:3
2007年
目的构建TIMP-1小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并观察其对肝星状细胞株TIMP-1mRNA表达的作用。方法根据siRNA设计原则,在TIMP-1mRNA序列中选择2个特异性靶序列(447-465nt、552~540nt)及1条无关对照序列;体外合成对应发卡样DNA片段,将其克隆入pGEM-T连接载体,BamH1和Xho1分别双酶切pGEM-T及表达载体pRNAT-U6.2,胶回收粘末端将特异序列定向亚克隆构建TIMP-1 pRNAT-U6.2/SiRNA载体,用脂质体包裹转染入T6细胞,采用RT-PCR检测TIMP-1mRNA表达水平的变化。结果所构建的TIMP-1pRNAT-U6.2/siRNA载体,经酶切鉴定与测序,结果显示特定位点靶序列与设计序列完全一致;转染T6细胞后,TIMP-1mRNA表达明显降低。结论成功构建TIMP-1 siRNA载体TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA,转染T6细胞可以有效抑制TIMP-1mRNA的表达。
田力
李继昌
赵国强
陈奎生
樊文辉
娄新
孙森森
曹学全
关键词:
基质金属蛋白酶抑制因子1
RNA干扰
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