齐鹏飞
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪清道夫受体SRA/CD204多克隆抗体的制备以及该受体介导的细菌吞噬功能分析被引量：2
- 2015年
- 针对猪SRA/CD204胞外区对应的基因片段（614～1324 bp）进行引物设计,PCR扩增获得目的片段并克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒p ET-SRA-c。利用原核表达系统获得高效表达于包涵体中的重组蛋白r SRA-c（约32 k Da）,利用亲和层析技术获得纯化的r SRA-c。利用纯化的r SRA-c为免疫原,免疫Balb/c小鼠（100μg/小鼠）,制备多抗血清。经Western blot结果显示,该多抗血清不仅可以识别r SRA-c,而且可以识别真核表达的全长的猪SRA/CD204（约55 k Da）。免疫荧光分析表明该多抗血清可以清楚地识别表达于CHO细胞膜上的SRA/CD204。最后,利用表达猪SRA/CD204的CHO细胞,对其介导的细菌吞噬功能进行了研究,结果表明猪SRA/CD204可以有效地介导大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的吞噬。本研究为进一步研究猪SRA/CD204在病原微生物感染中的作用奠定了基础。
- 黎倩倩张彦兵相笑魏建超齐鹏飞石元元陆莹梅夏鹏刘珂邵东华李蓓蓓马志永孙延鸣邱亚峰
- 关键词：清道夫受体重组蛋白多克隆抗体细菌
- 盖他病毒E2蛋白的表达纯化以及抗原性鉴定被引量：1
- 2015年
- 参考Gen Bank(EU015066)盖他病毒(Getah virus,GETV)SH05-6中结构蛋白E2的全基因序列并对其进行密码子优化。将优化后的基因片段克隆至原核表达载体p ColdⅠ中,构建重组表达载体p Cold-E2。重组质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG低温诱导后,SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果显示,在相对分子质量46 k Da处出现目的条带,与预期相符,且占大肠杆菌表达蛋白总量的80%。结果证明E2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,并且能与抗血清发生特异性反应。本研究为GETV快速检测方法的建立和GETV流行病学调查奠定了基础。
- 陆莹梅魏建超夏鹏吴亚玲黎倩倩武专昌齐鹏飞石坤李玉明邱亚峰李蓓蓓刘珂邵东华周望平马志永
- 关键词：原核表达E2基因
- Tet-On系统调控p53稳定表达的H1299细胞系的建立与应用被引量：2
- 2015年
- 应用Tet-on系统和H1299细胞,建立了p53诱导表达的H1299细胞系p53-Tet H1299,p53表达受强力霉素(doxycycline,Dox)调控,存在一定的剂量依赖性。诱导表达的p53蛋白有很好的核定位能力和转录活性,能显著上调p21、TLR3、Bax等多种p53转录激活的下游靶基因表达,同时还可显著抑制水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)的复制,说明p53-Tet H1299可作为研究p53抗病毒作用的细胞模型。p53诱导表达细胞系的建立为进一步研究p53抗病毒作用机制、转录调控基因的筛选及其他生物学功能研究提供了很好的研究工具。
- 武专昌王鑫魏建超杨逸凡赵秋华邵东华李玉明齐鹏飞刘珂李蓓蓓邱亚峰马志永
- 关键词：P53TET-ONH1299DOX抗病毒
