刘树辉
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
- 供职机构：锦州医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 枸杞多糖诱导大鼠骨髓间充质细胞向神经元样细胞转化的实验研究被引量：12
- 2006年
- ①目的探讨枸杞多糖诱导骨髓间充质细胞(BMSCs)向神经细胞转化的可能机制。②方法用贴壁筛选法分离培养出贴壁生长良好的骨髓BMSCs。选取第3代细胞,当传代细胞长满瓶底的80%以上时,先用含15%FBS和1g/L枸杞多糖的DMEM培养基预诱导24小时,然后,用不含血清的1g/L枸杞多糖的DMEM培养基诱导。光镜下观察细胞形态;用免疫组化技术检测细胞Nes-tin、NF、GFAP的表达。③结果预诱导后,BMSCs没有变化。而经过枸杞多糖诱导后,细胞在4小时后即出现形态学上的改变,细胞变凸,立体感增强,从胞体伸出突起。免疫组化检测显示,细胞Nestin、NF染色阳性,GFAP阴性。④结论骨髓间充质细胞经过枸杞多糖的诱导可以转化为神经细胞。
- 刘树辉马云胜曹中伟秦书俭郑德宇
- 关键词：骨髓间充质细胞枸杞多糖神经细胞
- SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分离培养的适宜条件。方法取1、2、4个月大鼠各6只,分离MSCs,以0.5×105/m l、1×105/m l、2×105/m l密度接种,通过倒置显微镜观察MSCs增殖情况,绘制生长曲线。流式细胞仪观察细胞周期并绘制细胞周期图。结果利用贴壁法成功培养出MSCs并能使之分裂增殖,但随着传代次数的增加,增殖能力有所下降。在培养过程中大鼠年龄要控制在2月以内,接种密度以1×105/m l适宜。结论贴壁培养法是一种简便易行的培养MSCs方法,操作简单,成功率高,可以作为培养SD大鼠MSCs常规方法。
- 刘树辉曹中伟秦书俭马云胜郑德宇
- 关键词：骨髓间充质干细胞SD大鼠
- 大鼠脊髓半切损伤模型的制备被引量：8
- 2005年
- 目的用一种新的方法建立简便易行,稳定可靠的脊髓半切损伤模型.方法取45只SD大鼠随机分为3组:假手术组为A组5只,40只为手术组(其中20只用眼用手术尖刀通过T11～T12椎间隙切割脊髓一侧1/2制成hSCI模型为B组,另20只用有齿血管钳咬除T11-12棘突和1/2椎板,用显微剪在T13～L1节段脊髓剪断其一侧1/2制成hSCI模型为C组).术后不同时间观察脊髓组织学变化,并记录脊髓神经功能综合评分(CBS).结果光镜下伤侧灰质缩小,脊髓远端侧索和灰质神经变性坏死,出现大量空泡而神经元减少且明显萎缩,Waller's溃变下节段较上节段严重,术后CBS评分两两比较q检验发现手术组与假手术组有显著意义(P＜0.01),但B组与C组CBS评分无显著性差异(P＞0.05).结论用眼用手术尖刀切割和显微剪切割制成hSCI模型具有同样的模型效果,但前者制备的模型死亡率低,更简单易行、安全可靠等优点.
- 曹中伟刘树辉马云胜郑德宇秦书俭
- 关键词：疾病模型
- 大鼠骨髓基质干细胞在成骨诱导剂条件下的成骨能力被引量：1
- 2006年
- 目的:观察在有成骨诱导剂存在的条件下,大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力。方法:实验于2005-07/12在锦州医学院中心实验室完成。选取清洁级2月龄SD大鼠6只,无菌条件下取双侧股骨,制备单细胞悬液。采用贴壁培养与传代结合方法分离纯化大鼠骨髓基质干细胞,将2代细胞置于含有1×10-7mol/L地塞米松、10mol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/L抗坏血酸成骨诱导剂的培养基中,培养21～30d。应用倒置显微镜观察骨髓基质干细胞与诱导后细胞形态,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,并用碱性磷酸酶染色和VON-KOSSA法检测成骨能力。结果:6只大鼠均进入结果分析。①骨髓基质干细胞形态学观察结果:在成骨诱导剂里细胞增殖变缓慢,呈长梭形、成纤维细胞样或不规则形。②细胞生长曲线:1～2d为潜伏期,细胞增殖不明显;3d后细胞增殖明显加快,进入对数生长期;6d后增殖变慢为平台期。经计算细胞群体倍增时间为38h。③细胞增殖周期检测结果:G0/G1期为(82.12±4.60)%,S期为(14.35±2.32)%,G2/M期为(0.87±0.30)%。④成骨能力检测结果:细胞碱性磷酸酶染色阳性率为86%,VON-KOSSA染色提示有钙结节形成。结论:大鼠骨髓基质干细胞在有成骨诱导剂存在的情况下成骨能力较高。
- 马云胜秦书俭刘树辉曹中伟罗美
- 关键词：骨髓祖代细胞骨生成抗坏血酸
