李炎
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 草鱼Trap1基因克隆及其在草鱼呼肠孤病毒感染过程中的抗细胞凋亡作用
- 草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus，GCRV）是引发草鱼出血病的主要病原，严重影响我国草鱼养殖行业的发展。GCRV属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属的双链RNA病毒，基因组分11个阶段，共编码12个蛋白...
- 李炎
- 关键词：草鱼出血病呼肠孤病毒抗细胞凋亡
- 免疫刺激诱导草鱼肿瘤坏死因子TNF-α的体外表达特征研究被引量：3
- 2016年
- 为了阐明免疫刺激诱导草鱼肿瘤坏死因子TNF-α的体外表达特征,克隆了草鱼TNF-α的c DNA,构建了原核表达载体p ET-32-TNF-α,并在大肠杆菌DH5α中表达了His6-TNF-α。利用亲和层析镍柱纯化表达重组蛋白后将其作为免疫原免疫小鼠制备了抗草鱼TNF-α多克隆抗体。免疫印迹实验显示,制备的抗体能特异性识别细胞内源性TNF-α。在此基础上,分别研究了GCRV(草鱼呼肠孤病毒)感染、免疫刺激物Poly(I:C)及LPS处理下不同时间点草鱼肾细胞CIK中TNF-α的表达情况,结果表明,TNF-α在草鱼肾细胞内翻译水平的表达量基本保持稳定。研究显示经典的TNF信号通路激活因子不能引起CIK细胞内TNF-α蛋白水平的显著变化。
- 卢翠玉李炎刘庆慧吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体
- 草鱼肾细胞电转条件的优化及草鱼呼肠孤病毒NS26蛋白的瞬时表达被引量：2
- 2014年
- 本研究先以pEGFP-N1载体质粒中的绿色荧光蛋白基因为报道基因进行电转实验,优化电压、脉冲时间、质粒添加量和电击次数等电转条件,确立最佳条件。实验表明,细胞密度为1.5×107/mL时,取200μl在0.2cm电击杯中进行电击转染,电压为200V,脉冲时间为45ms,添加质粒30μg,电击1次时,转染效果最佳。提取草鱼呼肠孤病毒基因组总RNA,以其逆转录的cDNA作为扩增模板,设计特异引物扩增出GCRV非结构蛋白NS26的基因片段,重组到pEGFP-N1载体上得到重组质粒pEGFP-NS26,将其导入CIK细胞中用电转法高效表达了EGFPNS26融合蛋白。本研究为进一步研究NS26的功能奠定了基础。
- 李炎张娅楠吕利群
- 关键词：电转染草鱼呼肠孤病毒重组质粒
