卢翠玉
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用酵母双杂交技术筛选与wsv112互作的宿主蛋白被引量：2
- 2019年
- 对虾白斑综合征病毒(WSSV)开放阅读框wsv112编码脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTP pyrophosphatase, dUTPase)。为研究wsv112与宿主的互作关系,本研究采用酵母双杂交Gal4系统从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道cDNA文库中筛选与wsv112互作的候选蛋白。以WSSV为模板,构建pGBKT7-112诱饵载体,转化到Y2H Gold酵母菌感受态细胞中,转化菌液涂布到不同缺陷型培养基上,检测诱饵载体的自激性和毒性。将凡纳滨对虾肠道cDNA文库与诱饵菌株pGBKT7-112接合,通过筛选力度不同的缺陷型培养基、颜色反应、PCR、测序鉴定等步骤筛选阳性克隆,将阳性菌株提取质粒,再经过回复杂交实验验证筛选出的阳性质粒与诱饵载体的作用。研究表明,诱饵载体pGBKT7-112无自激性和毒性,可用于酵母双杂交实验;经初筛和回复杂交实验最终得到2个阳性质粒,经过NCBI数据库对比,其编码的蛋白分别与日本囊对虾(Penaeus japonicus) C型凝集素(AGW27416.1)和克氏原螯虾(Procambarus clarkii) 40S核糖体蛋白S20小亚基蛋白(ALE99171.1)具有37%和98%同源性。本研究为wsv112的调控机制提供新的线索。
- 王中一刘庆慧卢翠玉黄倢
- 关键词：对虾白斑综合征病毒DUTPASE酵母双杂交
- 免疫刺激诱导草鱼肿瘤坏死因子TNF-α的体外表达特征研究被引量：3
- 2016年
- 为了阐明免疫刺激诱导草鱼肿瘤坏死因子TNF-α的体外表达特征,克隆了草鱼TNF-α的c DNA,构建了原核表达载体p ET-32-TNF-α,并在大肠杆菌DH5α中表达了His6-TNF-α。利用亲和层析镍柱纯化表达重组蛋白后将其作为免疫原免疫小鼠制备了抗草鱼TNF-α多克隆抗体。免疫印迹实验显示,制备的抗体能特异性识别细胞内源性TNF-α。在此基础上,分别研究了GCRV(草鱼呼肠孤病毒)感染、免疫刺激物Poly(I:C)及LPS处理下不同时间点草鱼肾细胞CIK中TNF-α的表达情况,结果表明,TNF-α在草鱼肾细胞内翻译水平的表达量基本保持稳定。研究显示经典的TNF信号通路激活因子不能引起CIK细胞内TNF-α蛋白水平的显著变化。
- 卢翠玉李炎刘庆慧吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体
- 表没食子儿茶素没食子酸酯作为防治对虾白斑综合症药物的应用
- 本发明涉及表没食子儿茶素没食子酸酯的新用途，即表没食子儿茶素没食子酸酯在制备防治对虾综合症的药物中的应用。其优点表现在：本发明首次通过试验证实，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)能够拮抗WSSV病毒的侵入感染，防治对虾...
- 吕利群王浩喻飞夏思瑶卢翠玉陈垚曲
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