王博
- 作品数：2 被引量：13H指数：1
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- 玻璃珠-涡旋振荡改良法用于硅藻DNA提取被引量：1
- 2022年
- 目的检验玻璃珠-涡旋振荡改良法提升硅藻DNA提取的效果。方法以DNeasyPowerSoilPro试剂盒为对照,另选取2种不同原理的植物DNA提取试剂盒(新型植物基因组DNA提取试剂盒、PlantDNA Isolation试剂盒)和1种血液DNA提取试剂盒(全血基因组DNA提取试剂盒)对同一水样及同一溺死案件肺组织的硅藻DNA进行提取。设计不同大小玻璃珠质量比和涡旋振荡时间的组合,选择加入玻璃珠振荡的最佳DNA提取条件。将常规组与改良组的提取产物直接进行电泳,经硅藻特异性PCR扩增检测,采用qPCR对提取物进行定量,对各组的Ct值进行统计学分析。结果当涡旋振荡频率为3000r/min时,DNA提取的最佳组合为涡旋振荡4 min,大小玻璃珠质量比为1∶1。以DNeasyPowerSoilPro试剂盒的Ct值为参照,10 mL水样的Ct值大于0.5g组织的Ct值。其他3种试剂盒采用玻璃珠-涡旋振荡改良法后,用于植物DNA提取的2种试剂盒Ct值均下降,且改良前后组织的Ct值差异均有统计学意义(P<0.05);全血基因组DNA提取试剂盒可以成功提取硅藻DNA,水样提取效果接近DNeasyPowerSoilPro试剂盒,改良法用于组织样本后,其Ct值差异有统计学意义(P<0.05);但应用3种试剂盒对水样中硅藻DNA进行提取时,改良前后的Ct值只有新型植物基因组DNA提取试剂盒差异具有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃珠-涡旋振荡改良法可提高植物及血液DNA提取试剂盒对法医学检材中硅藻DNA的提取效果,特别是对组织样本中硅藻DNA的提取。
- 蔡杰王博胡孙林曲一泓宋涛陈建华邓建强
- 关键词：法医病理学溺死DNA提取硅藻
- 诱导多能干细胞的安全性及应用研究进展被引量：12
- 2017年
- 背景:诱导多能干细胞技术解决了伦理学和免疫排斥等矛盾,高效安全定向诱导多能干细胞技术成了当今研究的主流。目的:综述诱导多能干细胞的诱导安全性和应用进展。方法:应用计算机检索Pub Med及中国期刊全文数据库2006年1月至2016年3月有关诱导多能干细胞的文章,英文检索词为"induced pluripotent stem cell,reprogramming,clinical application,safety,transcription factor,disease model",中文检索词为"诱导多能干细胞,重编程,临床应用,遗传安全性,转录因子,疾病模型"。结果与结论:近年来诱导多能干细胞的研究备受科研界和医学界的关注,并努力克服了免疫和伦理问题,成功获得了诱导多能干细胞。但由于无法解决诱导多能干细胞技术中的安全性、效率和诱导多能干细胞细胞再分化机制等方面的问题,而局限于理论和实验室研究,迟迟无法应用于临床。如何安全高效的将诱导多能干细胞诱导为患者需要的类型并进行移植,如何建立良好的疾病模型与高通量药物筛选平台,涉及各方面的基础研究,面临着巨大的困难和挑战。
- 田胜男王博李琦黄元华马燕琳
- 关键词：干细胞多能干细胞诱导多能干细胞重编程转录因子疾病模型国家自然科学基金
