周鹏 作品数:11 被引量:13 H指数:2 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 电子电信 更多>>
RNA干扰HSP27基因表达对膀胱逼尿肌细胞收缩特性的影响 被引量:1 2015年 目的探讨热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)低表达对体外培养人膀胱逼尿肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)肌动蛋白骨架结构及其收缩功能的影响。方法构建HSP27基因干扰慢病毒载体作用于BSMCs后,Western blot检测其抑制HSP27表达水平和干扰效率;通过鬼笔环肽荧光染色、Western blot检测BSMCs内F/G-actin比值检测等方法观察,干扰HSP27表达对BSMCs肌动蛋白骨架形态结构和聚合状态的影响;构建离体BSMCs三维培养模型,检测HSP27低表达对膀胱逼尿肌细胞收缩力的影响。结果成功构建HSP27干扰质粒p Green Puro-sh-HSP27,慢病毒载体高效感染BSMCs;与正常对照组比较,HSP27干扰组BSMCs细胞内肌动蛋白骨架结构紊乱和皱缩,检测F/G-actin比值(0.116±0.001)亦较正常BSMCs(8.717±0.500)明显下降(P<0.05);正常BSMCs三维培养模型在80 mmol/L KCl刺激下可检测到的最大收缩力为(8.4±0.6)mg显著大于HSP27干扰组[(3.8±0.2)mg,P<0.05]。结论 HSP27低表达状态可导致BSMCs肌动蛋白结构变化并导致其收缩功能受损。 熊智勇 周鹏 谢秋波 卢根生 王永权关键词:热休克蛋白27 肌动蛋白 逼尿肌细胞 人类乳头瘤病毒18 E7原癌蛋白对宫颈癌细胞系中组蛋白去乙酰化酶1表达的下调作用 被引量:5 2010年 目的研究宫颈癌中人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染与组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase1,HDAC1)表达之间的关系。方法运用RT-PCR和Western blot方法检测3株宫颈癌细胞中HDAC1表达水平。经脂质体2000介导将含有HPV18 E7基因的重组表达质粒瞬时转染人宫颈癌C-33A细胞,运用RT-PCR和Westernblot方法检测转染后C-33A细胞中HDAC1的RNA和蛋白水平改变。结果HDAC1在C-33A细胞中表达最高,CaSki细胞中次之,HeLa细胞中最少。C-33A细胞在转染HPV18 E7基因后HDAC1表达降低。结论HDAC1表达高低可能与HPV是否感染及感染亚型有关,HPV18 E7可能直接或间接下调细胞中HDAC1表达。 周鹏 何凤田 刘东擘 黄刚 龚薇 许志臻关键词:表观遗传学 宫颈癌 组蛋白去乙酰化酶 尿路感染致病菌分布及尿液pH值改变在临床防治中的作用 被引量:6 2010年 目的探讨尿路感染(urinary tract infection,UTI)常见致病菌的分布及其尿液pH值的特征。方法采集606例本院UTI细菌培养阳性结果及感染后尿pH值数据,分析致病菌的分布,按照菌属将主要致病菌分为3组,统计分析不同菌属感染尿pH值的差异。结果UTI致病菌总例数606例,埃希菌属186例(30.7%),感染尿液pH值集中地分布于6.21~6.33;念珠菌属152例(25.1%),尿pH值集中分布于5.81~5.95;肠球菌属86例(14.2%),感染尿pH值集中分布于6.10~6.28。比较3组尿液pH值发现念珠菌属感染的尿pH值明显偏酸(P<0.05)。结论UTI尿pH值发生改变,不同的UTI致病菌所对应的尿pH值不同且差别较大,通过调整尿pH值能更有效地抑制致病菌的生长,提高抗菌药物的药物效应。 周鹏 卢根生 张庆华 林吓聪关键词:尿路感染 致病菌 尿PH值 小鼠干扰素epsilon在大肠杆菌中的可溶性表达 2017年 目的构建小鼠干扰素epsilon蛋白的原核表达质粒,诱导表达和纯化后获得稳定的可溶性重组蛋白。方法将目的基因克隆到表达载体p ET28a-SUMO,与能同时表达3个分子伴侣gro ES、gro EL和tig的质粒p G-tf2一起转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析柱、Desalting柱、Q-HP柱及Superdex75分子筛层析经行纯化后,用Ulp1酶切,并对目标蛋白进行质谱分析。对目标蛋白抑制肿瘤细胞增长活性、刺激细胞产生抗病毒蛋白的活性进行鉴定。结果成功构建了重组质粒p ET28a-SUMO-IFN-ε和分子伴侣共表达,获得较多可溶性蛋白。目标蛋白酶切后仍可溶,SDS-PAGE分析显示重组IFN-ε蛋白表观相对分子质量为22 000。质谱分析证实目标蛋白的序列和小鼠IFN-ε的序列吻合。小鼠IFN-ε能够抑制肿瘤细胞的生长并能诱导细胞产生抗病毒蛋白Mx A。结论小鼠IFN-ε蛋白可以和分子伴侣一起在原核系统中以可溶形式表达,并证明此蛋白具有生物学活性。 谢秋波 常秋霜 周鹏 崔丽伟 郭玲 刘威 张庆华 卢根生关键词:干扰素 分子伴侣 原核表达 纯化 不同融合方法对2D-3D模式IGRT影像融合度的影响 目的:2D-3D模式的图像引导放疗已被广泛应用于放疗的临床实践,通过将二维的kv级平面夹角成像数据与三维CT影像数据进行匹配和融合,可以为治疗过程中的靶区外放边界优化、疗效评估、体位偏差纠正等提供有益的参考。我们试图探索... 胡南 刘岩海 徐婷婷 周鹏 苏坤普 游士虎 余娴 马俊刚 杨镇洲 王阁关键词:IGRT 图像融合 离散小波变换 宫颈癌中端粒酶抑制因子PinX1基因变异位点分析 2011年 目的探讨端粒酶抑制因子PinX1(Pin2/TRF1-interacting protein X1)在宫颈癌细胞系、正常宫颈组织标本、宫颈癌组织标本中的变异情况。方法采用3种宫颈癌细胞系(加以3种淋巴瘤细胞系、1种乳腺癌细胞系作为参照)、28例正常宫颈组织及52例宫颈癌组织标本。提取基因组DNA为模板,PCR扩增PinX1基因全部7个外显子及其部分侧翼序列,PCR纯化产物直接测序从而检测PinX1基因的变异情况,SPSS统计学软件进行数据分析。结果于宫颈癌细胞系中发现3个突变位点,于52例宫颈癌组织中发现5个变异位点,其中位于第7外显子的Ser254Cys(23.1%)及位于第2内含子的IVS2+18 G→A(51.9%)变异率与正常宫颈组织相比有显著差异(P<0.05),位于第2内含子的1个变异位点IVS2+64 C→A(9.3%)为首次报道。结论在宫颈癌中,可能存在PinX1基因的变异新位点,对PinX1基因变异的研究,可能为宫颈癌的诊断、防治和个体化诊疗提供潜在的新靶标。 吴庚泽 郑英如 张立 周鹏 黄刚 龚薇 何凤田关键词:宫颈癌 基因变异 MiR-7下调LXRβ表达而抑制HepG2细胞脂质生成的作用 2016年 目的初步探讨miR-7对LXRβ的抑制作用及其在肝细胞脂质生成中的作用。方法生物信息学分析,预测LXRβmRNA的3'-UTR上miR-7的可能结合位点。在人肝细胞系Hep G2中转染miR-7,以Real-time PCR、Western blot检测LXRβmRNA水平和蛋白水平表达的变化;构建LXRβ3'-UTR报告基因质粒p MIR/LXRβ,Report assay检测报告基因荧光素酶活性;Real-time PCR检测miR-7对LXRβ激动剂诱导的脂质生成相关靶基因FAS、ACC的表达变化。结果在人肝细胞中,miR-7能够显著抑制LXRβ的表达(P<0.05),且miR-7能降低LXRβ重组质粒p MIR/LXRβ的荧光素酶活性(P<0.05)。同时抑制其激动剂对脂质代谢相关靶基因的诱导作用。结论 miR-7可通过结合在LXRβ3'-UTR区域而抑制其表达,进而抑制FAS、ACC的表达而抑制脂质生成。 付晓红 钟丹 许志臻 周鹏 闫小晶 赵力 黄刚关键词:肝细胞 UTI尿液pH值改变及对UPEC生长、毒力因子表达影响的临床及实验研究 目的: 尿路感染(Urinary tract infections,UTI)是泌尿系统的常见病、多发病。Maskell[1]估计约50%的妇女一生中有过泌尿道感染。我国的普查资料显示,女性的发病率为2.05%。尽管当... 周鹏文献传递 基于NLM算法的CBCT图像去噪研究 目的:锥形束CT具有剂量低、实时性好、使用方便等优点,广泛应用于图像引导的精确放射治疗.但是由于原子的散射,CBCT图像存在大量的噪声,对比度低,图像分辨率低,影响了后续的图像配准,从而影响了精确放疗的精度.针对噪声问题... 刘岩海 徐婷婷 周鹏 苏坤普 游士虎 胡南 王阁关键词:恶性肿瘤 非局部均值 文献传递 HPV16/18 E7对宫颈癌细胞中HDAC1表达的影响 研究目的:宫颈癌是女性多发的恶性肿瘤,而人类乳头瘤病毒(HPV)感染是早已被临床和流行病学研究证实的宫颈癌发生发展的主要因素。其中HPV16、18是临床检出率相对较高的两种HPV高危亚型。HPV病毒编码的E7是重要的原癌... 周鹏关键词:HDAC1 表观遗传学 文献传递