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靶向CD19嵌合抗原受体载体的构建及其稳转细胞体外活化效应的研究: 2017年; 目的构建靶向CD19嵌合抗原受体载体并通过建立稳转细胞系检测其在体外的活化效应。方法合成获取CD19的CAR片段，转入pCMV6-Entry质粒，构建pCMV6-Entry—CAR载体。通过重组酶的作用将pCMV6一Entry—CAR载体和pLenti6．3／V5-DEST载体进行重组。形成pLenti6．3／V5．DEST．CAR载体，将其包装入慢病毒并感染Jurkat细胞建立稳转细胞系。将稳转的Jurkat细胞和Raji细胞共孵育后，利用ELISA检测上清IL-2的含量，判断Jurkat细胞的活化状况。结果成功构建了pLenti6．3／V5-DEST-CAR载体，感染筛选后的Jurkat细胞可稳定表达CD19的CAR，与Raji细胞共孵育后细胞上清中IL-2的浓度增加至22pg/ml。结论实验中构建的pLenti6．3／V5-DEST—CAR载体能够稳定转染并表达于Jurkat细胞系中，并能有效促进其激活效应。为下一步优化CART细胞提供基础。; 王振禹姜英浩许承明阮班军叶子晨翟东昇卢兹凡; 关键词：CD19 增殖

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许承明