张小鹰
- 作品数：14 被引量：28H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
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- PKCα siRNAs有效序列的筛选及其对肺癌A549细胞的作用
- 2009年
- 目的探讨人蛋白激酶Cα(PKCα)小干扰RNA(siRNA)对肺癌A549细胞生长增殖及凋亡的影响。方法设计并化学合成6条PKCα siRNAs,转染A549细胞,通过改良MTT法及RT-PCR筛选;对3条效果较好的PKCα siRNAs,进一步采用克隆形成抑制实验、Hoechst 33258染色、PI单染和AnnexinⅤ/PI双染以及Western blot检测。结果6条PKCα siRNAs均显著下调了PKCα mRNA水平;除No.5siRNA外,其他5条siRNA均显著地抑制了A549细胞增殖(P<0.05)。3条效果较好的PKCα siRNAs转染组PKCα蛋白的表达显著下调,克隆形成抑制率、亚二倍体百分率和早期凋亡细胞比例均显著高于对照组(P<0.05),并出现了核固缩、边聚和裂解等凋亡形态学变化。结论本实验发现3条能显著抑制A549细胞增殖并诱导其凋亡的PKCα siRNAs。
- 严玉霞蒋建伟黄志宏林春兰张小鹰吴风云
- 关键词：蛋白激酶CΑ小干扰RNA肺癌A549
- 促肝细胞生长素部分逆转巨噬细胞趋化因子和马兜铃酸Ⅰ诱导的人肾小管上皮细胞转分化
- 2010年
- 目的观察促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)对巨噬细胞趋化因子(monocyte chemo-tatic protein-1,MCP-1)协同马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡及上皮细胞-间质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外培养的HKC随机分为:空白对照组、转分化模型组及不同浓度pHGF(0.15、1.5、15、150、1500ng/ml)处理组。转分化模型组采用MCP-1(0.1μg/ml)协同AAⅠ(10μg/ml)诱导HKC转分化模型;pHGF处理组采用不同浓度pHGF对转分化模型HKC进行处理;空白对照组常规培养。采用WST-8法和流式细胞术观察各组细胞增殖和凋亡情况;RT-PCR检测各组细胞α-SMA mRNA表达;免疫组化检测各组细胞α-SMA、TGF-β1、FN蛋白的表达。结果与空白对照组相比,转分化模型组、不同浓度pHGF处理组HKC细胞增殖抑制率,凋亡细胞所占比例,α-SMA mRNA表达均明显升高(P<0.01),提示转分化模型制备成功。与转分化模型组细胞相比,pHGF(150ng/ml)处理组HKC增殖抑制率明显降低(P<0.01),各浓度pHGF处理组HKC凋亡细胞所占比例均明显降低(P<0.01),HKC细胞α-SMA mRNA表达下调(150ng/ml pHGF处理组尤明显);α-SMA、TGF-β1、FN蛋白表达下调。结论pHGF(150ng/ml)可部分逆转MCP-1协同AAⅠ诱导的HKC增殖抑制、凋亡和EMT。
- 陈超蒋建伟周序珑严玉霞陈涛张小鹰
- 关键词：促肝细胞生长素肾小管上皮细胞细胞凋亡
- 辛伐他汀联合5-FU对K562细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨辛伐他汀(Sim)联合5-FU对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:体外培养人白血病K562细胞,用MTT法观察Sim联合5-FU对细胞的增殖抑制作用,实时荧光定量RT-PCR观察对bcr/abl融合基因mRNA表达水平的影响。流式细胞术、Hoechst33258染色观察Sim与5-FU联合应用诱导细胞凋亡的作用。结果:低浓度的Sim与5-FU联合应用在抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡,均较各单一高浓度用药组的作用明显增强,并且下调bcr/abl融合基因mRNA表达。结论:Sim与5-FU联用具有明显的协同抑制细胞增殖的作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡,下调bcr/abl融合基因的表达有关。
- 何金花吴风云刘冠杰张小鹰廖晓丽蒋建伟
- 关键词：辛伐他汀5-氟尿嘧啶K562细胞凋亡
- 促肝细胞生长素改善单侧输尿管梗阻大鼠肾脏纤维化的研究被引量：4
- 2007年
- 目的:研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)改善梗阻性肾病肾小管间质纤维化的疗效和机制。方法:17只SD大鼠随机分为假手术组(SOR)、单侧输尿管梗阻组(UUO)和pHGF治疗组。给药组用促肝细胞生长素pHGF(30μg.kg-1.d-1)大鼠腹腔注射,其余组给予等剂量生理盐水。14 d后收获大鼠。通过测定肾皮质羟脯氨酸含量比较纤维化改变;肾脏病理分析用H.E.和Masson染色,免疫组化检测TGF-β1,α-SMA,FN在肾组织中的表达。结果:肾组织羟脯氨酸定量UUO组明显高于SOR组,pHGF组,pHGF组介于二者之间,P(0.01;Masson染色SOR组仅在血管和基底膜处有绿染的胶原纤维,UUO组胶原成分增多,而pHGF组较UUO组明显改善,P(0.01。免疫组化显示pHGF能明显降低梗阻肾组织TGF-β1,α-SMA,FN的表达水平降低,与UUO组比较,P(0.01。结论:pHGF能有效缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化。
- 陈超蒋建伟周序珑严玉霞吴颜晖陈涛张小鹰
- 关键词：促肝细胞生长素单侧输尿管梗阻肾间质纤维化
- 靶向apollon反义核酸抑制结肠癌细胞增殖并提高化疗药物的敏感性被引量：4
- 2011年
- 研究凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族成员apollon反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)作用于结肠癌Lovo细胞,观察其对细胞的增殖抑制作用、致凋亡作用及对某些化疗药物敏感性的影响。将人工合成的apollon ASODN,经脂质体包裹后作用于结肠癌Lovo细胞48 h后,采用WST法与克隆形成抑制实验检测不同浓度的apollon ASODN对Lovo细胞增殖抑制作用;实时荧光定量RT-PCR检测细胞apollon mRNA的表达水平;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Hoechst 33258染色观察Lovo细胞凋亡的形态学改变;采用apollon ASODN联合5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、盐酸表柔比星(EPI),观察对Lovo细胞增殖抑制作用。实验表明,apollon ASODN转染Lovo细胞48 h,能明显下调apollon mRNA的表达,细胞增殖和克隆形成均被显著抑制(P<0.05),并呈浓度依赖关系。Apollon ASODN组G0/G1期细胞减少,S期细胞增多,出现明显的S期阻滞。流式细胞术检测结果显示,apollon ASODN组存在明显的细胞凋亡,经荧光显微镜观察,可见核固缩、边聚、裂解等细胞凋亡形态学变化。0.08μmol.L-1 apollon ASODN与不同浓度的化疗药物(5-FU、DDP、EPI)联合作用于Lovo细胞48 h,可提高Lovo细胞对这些化疗药物的敏感性,增敏倍数分别为2.58、4.47和5.33倍。结果提示,apollon ASODN可下调apollon基因的mRNA表达水平,抑制Lovo细胞增殖,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于S期,并提高结肠癌细胞对5-FU、DDP、EPI的敏感性。
- 何金花张小鹰吴风云廖晓莉王威蒋建伟
- 关键词：APOLLON反义核酸LOVO细胞结肠癌
- Bcr/abl融合基因的小干扰RNA对K562细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察特异性bcr/abl融合基因的siRNA对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并化学合成bcr/abl融合基因融合位点b3:a221个核苷酸siRNA作用于K562细胞,用WST-8法检测细胞增殖抑制率;RT-PCR检测bcr/abl mRNA表达水平;PI单染流式细胞仪检测细胞周期;AnnexinV-PI双染测定细胞凋亡比例;Hochest33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果①Bcr/ablsiRNA作用K562细胞24,48,72h后,明显抑制K562细胞增殖,各浓度组间的增殖抑制率差异无显著性(P>0.05);②Bcr/ablsiRNA能显著下调bcr/abl mRNA水平,各浓度组间差异无显著性(P>0.05);③Bcr/ablsiRNA作用组细胞周期阻滞于G1期;④Bcr/ablsiRNA作用后细胞出现明显的早期凋亡群,各浓度组间的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),细胞出现核固缩、核边集、凋亡小体等改变。结论特异性bcr/ablsiRNA可显着抑制K562细胞bcr/abl融合基因的表达,抑制细胞的增殖,诱导凋亡,但其作用未显示明显的剂量依赖性。
- 张小鹰曾慧兰蒋建伟陈涛吴风云何金花韩新爱廖晓莉
- 关键词：BCR/ABLSIRNAK562细胞凋亡
- PKC-α反义核酸提高SMMC-7721细胞对化疗药物的敏感性研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨蛋白激酶C(protein kinase c)反义核酸(antisense oligonucleotides,ASODN)联合5-Fu、HCPT、As2O3三种化疗药物对肝癌SMMC-7721的体外高效抑制作用。方法以聚乙烯亚胺(poly-ethylenei mine,PEI)作载体转染PKC-αASODN,用WST-8法检测单纯使用5-Fu、As2O3、HCPT三种化疗药物以及其联合PEI-ASODN对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,并分别计算抑制率和IC50。结果5-Fu、As2O3、HCPT与PEI-ASODN物联合使用后,其IC50分别降低到3.9μg/ml、2.67μmol/L、1.46μg/ml,化疗药物的敏感性分别提高到单用化疗药物的2.86、1.84和4.01倍。结论PEI介导的PKC-αASODN与化疗药物5-Fu、As2O3、HCPT联合使用,可提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性,通过与化疗药物的相加或协同作用,减少化疗药物的用量。
- 陈涛蒋建伟黄志宏严玉霞陈超张小鹰
- 关键词：蛋白激酶C反义核酸化学治疗聚乙烯亚胺
- PEI介导PKC-α反义核酸对肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用
- 2009年
- 目的:研究聚乙烯亚胺(PEI)-PKC-α反义脱氧核寡酸(ASODN)对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。方法:RT-PCR检测肝癌SMMC-7721细胞、HepG2细胞PKC-α mRNA表达的差异,细胞增殖抑制实验检测PEI和ASODN混合的最佳质量比,WST法和克隆形成抑制实验检测细胞增殖抑制作用,免疫荧光检测PKC-α的表达水平。结果:SSMC-7721细胞PKC-α mRNA表达相对较高,PEI和ASODN的质量比为0.75/1时是PEI转染反义核酸的合适比例,对SMMC-7721细胞具有明显的增殖克隆抑制作用,且呈剂量-效应关系;ASODN和PEI-ASODN对SMMC-7721的IC50分别为16.6μmol/L和0.58μmol/L;PEI-ASODN能够有效抑制PKC-α蛋白的生物合成。结论:PEI-ASODN能显著抑制SMMC-7721细胞增殖和克隆形成,下调PKC-α蛋白的表达。
- 张小鹰蒋建伟陈涛严玉霞黎泳欣何金花
- 关键词：蛋白激酶C-Α反义核酸肝癌SMMC-7721细胞
- 倍半萜内酯类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用
- 申请公开了倍半萜内酯类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用，本申请式(I)的白花地胆草单体EM‑6是从白花地胆草中的提取鉴定的新型倍半萜内酯类化合物，对肝癌细胞具有较好增殖抑制作用，且对肝上皮LO2细胞以及支气管上皮样HBE...
- 蒋建伟侯昌炎唐晶晶张清李强周俊臻古建仪张小鹰甘丹卉洪泓
- 槐耳清膏诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究被引量：13
- 2009年
- 目的研究槐耳清膏对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其作用机制。方法用终浓度为0、0.5、1、2、4、6 mg/mL的槐耳清膏和10μg/mL的5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用于SGC-7901细胞,分别于24 h和48 h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率;48 h后收集各组胃癌SGC-7901细胞,琼脂糖凝胶电泳检测DNA,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测survivin mRNA表达。结果MTT法检测显示,槐耳清膏对胃癌SGC-7901细胞有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系(P<0.05);槐耳清膏6 mg/mL组的抑制率48 h后达到(77.9±2.3)%,5-Fu组为(53.4±1.6)%,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测显示,槐耳清膏4 mg/mL组的细胞凋亡率最高,早期凋亡细胞达33.2%;6 mg/mL组早期凋亡细胞6.3%,而晚期凋亡细胞为19.9%。RT-PCR结果显示,槐耳清膏组胃癌SGC-7901细胞survivin mRNA表达下调。结论槐耳清膏在体外对胃癌SGC-7901细胞有明显的增殖抑制和凋亡诱导作用,初步推断槐耳清膏诱发胃癌细胞凋亡与其对survivin基因表达的抑制有关。
- 吴志慧蒋建伟曹明溶陈涛张小鹰吴风云
- 关键词：槐耳清膏胃癌凋亡生存素
