陈莉
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：福建省科委基金教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学石油与天然气工程更多>>
- 鸡氨肽酶H在大肠杆菌中的表达、纯化与部分酶学性质分析被引量：5
- 2008年
- 氨肽酶H(Aminopeptidase H,APH))是生物组织内一种常见的氨基内肽酶,但因为天然材料中含量很低,基本无法深入研究其催化机理、功能与结构的关系及其在生物体内的确切功能。从鸡肝组织克隆了APH的全基因序列,并把该序列亚克隆到载体pET22b(+)上,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),构建了APH的表达菌株。该菌株经IPTG诱导,在SDS-PAGE上明显出现一条与天然APH理论分子量一致的新增蛋白带,该条带的浓度随着表达时间的延长逐渐加深;6h基本达到平衡,此时重组蛋白占总蛋白的16.7%,表达水平高达94.7mg/L。对表达产物进行了活性检测、纯化和酶学性质分析,发现重组蛋白在亚基构成,热稳定性,最适pH等方面与天然APH基本相同,据此可以确认表达产物确实是APH,发酵液总活力达到1636u/L。这些结果为APH的催化机理及其在生物体内的功能的阐明奠定了重要的物质基础。
- 赖庆安刘树滔卢菀华陈莉Toshihide NISHIMURA饶平凡
- 关键词：纯化酶活
- 大黄鱼生长激素基因的克隆与表达被引量：11
- 2004年
- 采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%.
- 陈莉邓文汉卢菀华刘树滔饶平凡
- 关键词：大黄鱼生长激素基因克隆
