潘晓峰
- 作品数：18 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军第九七医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京军区医学科学技术研究计划课题南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因重组hTFF3治疗烧伤小鼠肠黏膜损伤的实验研究
- 目的：观察基因重组hTFF3对严重烧伤所致肠黏膜损害的治疗作用.方法：采用30％体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,随机分成对照(C)组、烧伤对照(B)组和烧伤后hTFF3治疗(TFF3)组,TFF3组伤后1小时开始灌胃hTFF3...
- 孙勇王良喜毛学飞邓向东潘晓峰吴杭庆张方
- 关键词：三叶因子3烧伤肠黏膜
- 人三叶因子3对烧伤小鼠胃黏膜的保护作用研究被引量：5
- 2013年
- 目的观察基因重组人三叶因子3(hTFF3)对严重烧伤所致胃黏膜损害的保护作用。方法采用30%体表面积Ⅲ°烧伤小鼠作为模型。将小鼠随机分成正常对照(A)组、烧伤对照(B)组和hTFF3治疗(C)组,C组伤后1 h开始灌胃hTFF3,剂量为1 mg/kg,B组灌胃等量生理盐水,各组每天灌胃1次,连续5 d。观察烧伤后胃黏膜损伤指数、胃黏膜大体形态学改变、病理学改变,以及病死率。结果烧伤小鼠每天给予1 mg/kg的hTFF3灌胃,胃肠黏膜受损程度显著降低,胃黏膜病理改变明显减轻,B组以出血、坏死和溃疡为主,C组以充血、水肿为主,小鼠5 d病死率有所下降(27.3%、45.6%)。结论重组hTFF3对烧伤后胃肠道损伤具有明显的治疗作用,能促进受损黏膜屏障的重建。
- 孙勇王良喜毛学飞邓向东潘晓峰吴杭庆张盼张方
- 关键词：三叶因子3烧伤胃黏膜
- 壳聚糖纳米粒作为肠三叶因子基因传递载体的实验研究
- 2014年
- 目的构建理想的人肠三叶因子(human intestinal trefoil factor,hITF)基因传递系统。方法利用复凝法制备载基因壳聚糖纳米粒,用透射电镜观察纳米粒的形态及大小,以Zeta电位仪检测不同N/P比及不同pH对制备的载基因纳米粒Zeta电位的影响,琼脂糖凝胶电泳分析纳米粒对基因的包载能力,高速离心法测定纳米粒的包封率和载药量,分析纳米粒中基因的体外释放过程,最后检测纳米粒在HEK293细胞中的转染效率。结果利用复凝法制备了不同N/P比的壳聚糖纳米粒,透射电镜显示粒径小于1 000 nm,粒径呈窄分布;Zeta电位与N/P比呈正相关,而与pH值呈负相关;凝胶阻滞实验说明壳聚糖在N/P比大于1时可以完全包裹质粒;包封率随着N/P比的增加而增加,载药量则随着N/P比的增加而减小;体外释放实验显示,纳米粒释放速度先快后慢,并且随着N/P比的增加而逐渐减慢;壳聚糖纳米粒对HEK293细胞的转染率超过50%。结论成功构建了理想的hITF基因传递系统,为壳聚糖介导hITF基因治疗的应用打下基础。
- 孙勇王良喜孙曙光毛学飞邓向东潘晓峰张方
- 关键词：壳聚糖基因治疗
- 股前外侧游离皮瓣修复烧伤后头面部骨外露八例被引量：1
- 2015年
- 烧伤后头面部骨外露较少见，但其极易造成毁容。头面部的局部皮瓣面积小，不适于修复较大面积的创面，而若采用远位皮瓣如肩三角皮瓣或胸大肌皮瓣等，则供区处于易暴露部位，严重影响外观。随着显微外科技术的不断发展，临床更多采用游离皮瓣修复烧伤后头面部骨外露创面。
- 潘晓峰王良喜苏本玄毛学飞孙曙光孙勇
- 关键词：游离皮瓣修复骨外露创面头面部烧伤后股前外侧胸大肌皮瓣
- 长链非编码RNA在严重烫伤小鼠肠道组织中的差异表达及其功能研究
- 孙勇邱伟王朋张盼潘晓峰
- 壳聚糖-肠三叶因子纳米粒制备与体外转染的实验研究
- 2014年
- 目的:构建hITF基因传递系统,检测其细胞转染效果。方法:首先构建肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)的真核表达载体,再利用复凝法制备壳聚糖纳米粒,用透射电镜观察纳米粒的形态及大小,并利用HEK293细胞检验纳米粒的转染能力,最后利用RT-PCR和Western blot检测目的基因的转录及表达情况。结果:成功构建出hITF真核表达载体,利用复凝法制备了不同N/P比的壳聚糖纳米粒,透射电镜观察到粒度<1 000 nm,粒径呈窄分布;荧光显微镜及流式细胞仪检测显示,壳聚糖纳米粒对HEK293细胞的转染率约为80%,和脂质体的转染率基本一致;RT-PCR和Western blot检测说明hITF被成功转录并分泌表达。结论:成功构建了hITF理想的基因传递系统,为壳聚糖介导hITF基因治疗的应用打下基础。
- 孙勇王良喜孙曙光毛学飞邓向东潘晓峰张方陈宝君勒娟
- 关键词：壳聚糖基因治疗转染
- 腺病毒介导人肠三叶因子基因对肠上皮细胞的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 构建含有人肠三叶因子（hITF）基因的腺病毒载体,并观察其对肠上皮细胞的影响.方法 首先构建重组腺病毒载体,并感染人肠上皮细胞株Caco-2;然后行反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot检测,从mNRA及蛋白水平检测hITF表达;感染病毒细胞做爬片后行细胞免疫荧光检查;最后通过划痕实验,检测重组腺病毒对肠上皮细胞迁移功能的影响.结果 成功构建出重组腺病毒,可以感染人肠上皮细胞株Caco-2,感染效率接近100％;RT-PCR和Western blot检测证实,hITF被成功转录并分泌表达;细胞免疫荧光显示,hITF可表达于细胞核和细胞质,但以细胞质为主;划痕实验证明感染重组腺病毒对肠上皮细胞具有很强的促迁移能力,重组腺病毒组迁移距离为（216.67±16.43） μm,显著高于空载病毒组的（68.00±8.37） μm和对照组的（68.00±8.37）μm.结论 成功构建了含hITF基因的腺病毒载体,该载体对肠上皮细胞具有促迁移作用,为hITF基因治疗的应用打下基础.
- 孙勇勒娟陈宝君潘晓峰张方
- 关键词：肠三叶因子腺病毒肠上皮细胞迁移
- Spl对肠三叶因子启动子基础转录活性的影响被引量：1
- 2016年
- 目的寻找维持肠三叶因子（ITF）启动子基础转录活性的反应元件。方法以ITF启动子序列为模板，采用PCR方法获取不同长度及突变的ITF基因5’侧翼序列，插入pGL3-basle质粒，构建截短及突变荧光报告载体，进行以下实验。（1）按照随机数字表法（分组方法下同）将人胚胎肾293（HEK293）细胞分为pGL3-basic组、pGL3—300组、pGL3-280组、pGL3—260组、pGL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组，每组3孔，分别转染对应的质粒500ng及15ng海肾荧光素酶报告质粒pRL—TK，培养48h，单管型多功能检测仪检测细胞荧光素酶相对活性。（2）另取HEK293细胞，分为pGL3-basic组、pCL3—300组及突变体1、2、3、4组，每组3孔，分别转染pGL3-basic、pGL3—300及突变体1、2、3、4质粒500ng及15ngpRL—TK质粒。培养48h，同（1）检测荧光素酶相对活性。（3）另取HEK293细胞，分为空白对照组及10、50μmol／L光神霉素组，每组3孔，转染500ngpGL3—300质粒及15ngpRL·TK质粒后，空白对照组不加，后2组分别加10、50μmol／L光神霉素，培养24h，同（1）检测荧光素酶相对活性。（4）另取HEK293细胞，分为空白对照组及0．1、0．2、0．3μgpeDNA3．1-Spl组，每组3孔，转染500ngpGL3-300质粒及15ngpRL—TK质粒后，空白对照组不转染，后3组分别转染0．1、0．2、0．3μgpcDNA3．1-Spl质粒。培养48h，同（1）检测荧光素酶相对活性。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果（1）pGL3-basic组、pGL3-300组、pGL3．280组、pGL3—260组、pCL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性分别为1．00、7．99±0．51、2．03±0．55、2．50±0．40、2．50±0．15、1．72±0．19、2．10±0．21，pGL3—280组、pGL3—260组、pGL3—240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性较pGL3—300组显著下降（P值均小于O．01）。（2）pGL3-basic组、pGL3．300组及突变体1、2、3、4�
- 孙勇张盼潘晓峰张端阳邱伟王朋
- 关键词：转录启动子肠三叶因子SP1
- 肠三叶因子启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析被引量：2
- 2015年
- 目的:克隆肠三叶因子(ITF)启动子序列,构建ITF启动子荧光素酶报告基因载体,并检测启动子活性。方法:运用PCR方法从人全血基因组DNA中获得目的基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建不同长度的ITF启动子报告基因载体(-100--1 826bp);将重组质粒转染至HEK293细胞和LS174细胞48h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性。结果:PCR扩增出不同长度的ITF启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HEK293细胞和LS174细胞后检测启动子活性,100和200bp启动子活性较低,而300至1 826bp启动子活性较强。结论:成功构建了ITF启动子报告基因载体,具有活性的启动子最小长度为300bp。
- 孙勇勒娟潘晓峰张方
- 关键词：肠三叶因子荧光素酶报告基因启动子
- 股前外侧游离皮瓣移植修复烧伤后膝关节周围皮肤软组织缺损合并膝关节腔开放八例被引量：5
- 2015年
- 膝关节部位严重烧伤后，由于周围皮下组织少，易致关节韧带的变性坏死甚至关节腔开放，若不及时封闭关节腔，可能引起关节感染、关节面破坏，导致关节活动受限。如何封闭膝关节腔以及有效修复髌韧带，最大限度地恢复膝关节功能，成为困扰烧伤科医师的一道难题。
- 潘晓峰孙勇王良喜吴杭庆毛学飞孙曙光
- 关键词：皮瓣移植修复膝关节腔烧伤后股前外侧关节活动受限
