李芳芳
- 作品数:2 被引量:4H指数:2
- 供职机构:浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 信号转导抑制剂对TNFβ诱导L929细胞凋亡的研究被引量:2
- 2001年
- 本文采用 FDA- PI荧光染色 ,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人 TNFβ对 L92 9细胞的细胞毒效应 ,结果表明 TNFβ主要是诱导 L92 9细胞以凋亡的形式死亡 .实验还采用 8种信号转导抑制剂 ,观察它们对 TNFβ杀伤 L92 9细胞的影响 ,以探讨细胞凋亡的信号转导途径 .初步研究表明 :磷脂酶 A2 ,Ca2 + 通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制 TNFβ对 L92 9细胞的杀伤 ,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用 ;相反地 ,蛋白激酶 C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡 ;而环加氧酶、磷脂酰肌醇 -
- 李芳芳杨帆周晴马志章丁仁瑞邱莲女周永列
- 关键词:L929细胞细胞凋亡细胞毒效应抑制率
- 表达载体pRSET C重组rhTNF-β的表达及其纯化被引量:2
- 1999年
- 将hTNFβN端缺失23个氨基酸的基因,克隆在表达载体pRSETC的6个组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,rhTNFβ获得了高表达,表达量占细菌总蛋白的26%。其表达产物大部分以可溶性形式存在。菌体裂解上清经0.45μm滤膜过滤后,用固定化金属配体亲和柱层析,纯度可达95%左右;经肠激酶酶切后,具有TNFβ的细胞毒活性,此活性为9.8×109U/g。
- 邱莲女马志章周晴李芳芳陈常庆丁仁瑞
- 关键词:纯化