韩德胜
- 作品数:8 被引量:52H指数:4
- 供职机构:兰州生物制品研究所更多>>
- 发文基金:甘肃省科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 病毒活疫苗冻干保护剂筛选研究被引量:17
- 1996年
- 为提高冻干病毒性活疫苗的成品滴度和稳定性及提高疫苗生产的出品率,本研究通过对多种保护剂成分如明胶、山梨醇、蔗糖、乳糖、右旋糖苷、精氨酸等及其配比的大量反复筛选试验,已初步选定了数种可供选择并进一步优化完善的冻干保护剂配方。与现行冻干保护剂相比,其疫苗出品率在相同投入下可提高三倍。
- 王玉琳曾鸣王玲刘晓凡韩德胜李根明
- 关键词:病毒疫苗冻干保护剂冻干病毒病
- 硫酸鱼精蛋白去除Vero细胞乙脑疫苗残余DNA方法的条件优化被引量:4
- 2007年
- Vero细胞规模化生产疫苗时利用硫酸鱼精蛋白可去除乙型脑炎纯化疫苗中Vero细胞的DNA,实验中对不同条件进行了比较.首先在Vero细胞冻融浓缩液中分别按终浓度2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml、0.1mg/ml加入鱼精蛋白去除DNA,确定0.2~2 mg/ml均有良好去除效果;其次将Vero细胞培养的乙脑病毒浓缩液分3组:第1组按2mg/ml、1mg/ml和0.5mg/ml分别沉淀一次、两次;第2组加入终浓度1mg/ml PS后调pH值为pH6.0、6.4、6.8、7.2、7.6;第3组将NaCl浓度调整至0.029mol/L、0.145mol/L、0.725mol/L,加入终浓度1mg/mlPS.确定低浓度多次沉淀、pH值6.8~7.2、盐浓度0.145mol/L条件下沉淀效果最好.
- 韩德胜李振平李薇孙燕孙振鹏崔焰王玉琳
- 关键词:硫酸鱼精蛋白
- 生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗被引量:9
- 2009年
- 目的建立利用生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺。方法以Vero细胞作为乙型脑炎病毒增殖的细胞基质,使用微载体Cytodex-Ⅰ在15L生物反应器中进行高密度培养,采用2.5~4.5g/L的载体浓度培养乙型脑炎病毒,制备3批纯化乙型脑炎疫苗并进行检定。结果随着微载体浓度的增加,细胞密度升高。采用2.5~4.5g/L微载体培养的病毒收获液的平均滴度为7.38~7.56lgPFU/ml,收获量最高可达到12~15个有效罐体积。制备的3批疫苗各项质量指标均符合《中国药典》三部(2005版)相关要求。结论已建立了15L生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺,为进一步放大生产规模奠定了基础。
- 李薇李振平孙燕韩德胜周丽娟范秀娟王玉琳
- 关键词:生物反应器微载体VERO细胞乙型脑炎疫苗
- 微载体规模化培养细胞的研究被引量:9
- 2005年
- 通过实验探索使用微载体进行动物细胞规模化培养,以期达到建立规模化生产病毒疫苗的目的.实验研究了Vero细胞的生长曲线,以及对细胞生长过程中影响细胞生长的葡萄糖、氨含量两个主要因素的变化规律以及微载体浓度与细胞密度的关系.通过实验发现微载体规模化培养细胞易于操作,比传统转瓶培养的细胞密度高,封闭式的培养方式不但减少了污染几率,而且可以充分保证疫苗的质量.最终找出适宜疫苗培养的微载体使用浓度为2.5g/L,适宜的细胞接种浓度为: 1~5×105cell/ml.
- 韩德胜李振平李薇孙振鹏赵星文周丽娟刘晓凡王玉琳
- 关键词:微载体细胞培养VERO细胞
- 冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究被引量:1
- 1998年
- 报告了冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究结果,通过对鸡胚疫苗株的适应培养及对细胞培养生产工艺的试验优化,建立了连续细胞培养多次收获疫苗生产工艺并制备出了冻干细胞培养腮腺炎活疫苗制剂。本生产工艺切实可行,生产成本低、投入产出率高,所用原材料规范、质量易于控制,具有明显的技术优势。生产的冻干疫苗制剂质量稳定可靠,符合中国生物制品规程要求。
- 王玉琳王玲刘晓凡韩德胜曾鸣
- 关键词:腮腺炎疫苗
- HO·和γ射线对细胞致死效应的比较被引量:1
- 2002年
- 利用双链断裂模型比较研究了羟自由基和γ射线对B16、L0 2、SMMC - 772 1和V79四种细胞的致死效应。结果表明 :1.HO·处理和γ射线照射对四种细胞有都明显的致死效应 ,而且剂量越大致死作用越强。 2 .HO·处理和γ射线照射存活曲线都存在肩区 ,说明两种处理过程都有亚致死损伤的修复。 3.HO·诱导DNA双链断裂一般都需要两次击中而γ射线辐照既有一次击中的成分 ,也有两次击中的成分。 4.四种细胞对HO·的敏感性与对γ射线的辐射敏感性顺序相反 ,说明γ射线对细胞的作用不能简单地解释为自由基的行为。
- 韩德胜王琳娜
- 关键词:羟自由基Γ射线致死效应癌细胞
- 凝血酶冻干制剂冻干工艺选择研究被引量:3
- 2005年
- 在对凝血酶精制、制剂配制、稳定剂选择和冻干工艺试验、冻干制剂稳定性等进行了一系列的试验之后,建立了凝血酶冻干制剂的活性单位检测方法,得到了凝血酶冻干制剂(速效局部止血药200IU/ml和500IU/ml)的试制结果.在选定的制造工艺条件下,连续生产三批,经甘肃省药品检验所检定结果,无菌试验合格,单位含量合格并相当于标示量的100%~140%,比活高于10IU/mg,残余水份含量低于3%,制剂质量均达到2005版药典标准的要求.凝血酶冻干制剂的稳定性良好,37℃保存三个月后标示量下降在10%以内.
- 崔焰陈冬梅白植生马庆华张军韩德胜
- 关键词:凝血酶制剂稳定性
- 葡萄的随机扩增多态性DNA研究被引量:8
- 2004年
- 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)对11个样品进行了研究。这11个品种包含1个欧美杂交种,一个中国野生种(Vitis. piasezkii Var. pagnucii),9个欧亚种(Vitis. vinifera L)。选择了多态性好的7个10碱基寡聚糖核苷酸作为随机扩增的引物,在琼脂糖凝胶电泳上产生了76条带,其中63条具有多态性。各引物产生的条带从6到13不等,平均为10.86条/模板,其中9条具有多态性,表明葡萄基因的多态性十分丰富。通过遗传相似性分析表明11个葡萄基因的Nei氏相似性系数分布为0.1027~1.1787,平均相似系数为0.459。通过非加权算术平均数聚类法,获得了11个葡萄品种之间的遗传关系树图,欧亚种群,东亚种群和欧美杂种在遗传关系树图上被成功地聚为3组。本实验发现欧亚种和欧美杂种亲缘关系较近,而和中国野生种亲缘关系远。在欧亚种中,520A和SO_4的遗传距离最近,其次是井川1010和美人指,最大的遗传距离发生在桑无核和其他欧亚种之间。
- 刘茜刘玉冰韩德胜王刚
- 关键词:欧亚种葡萄野生种随机扩增多态性DNA