张雪
- 作品数：10 被引量：7H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科委国际合作基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学矿业工程更多>>
- Pin1在动脉粥样硬化及血管平滑肌细胞衰老中的作用
- 2018年
- 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)的衰老与动脉粥样硬化的发生和发展有密切关联,但研究者对其潜在机制所知甚少。肽基脯氨酰异构酶(peptidyl-proplyl isomerase,Pin1)在人类癌细胞中普遍过表达,参与调节细胞的生长与凋亡。然而,到目前为止, Pin1在VSMC衰老调节中的作用还是未知。该研究运用蛋白质印迹实验证实了在人体动脉粥样硬化的VSMC中Pin1蛋白水平下调(P<0.05),同时, p53、p21、Gadd45a以及p65的表达水平增加(P<0.05)。经β-半乳糖苷酶染色法证实,动脉粥样硬化的VSMC衰老增加。腺病毒介导的Pin1过表达下调p53、p21、Gadd45a以及p65的表达。研究结果表明, Pin1介导的VSMC衰老是多信号因子参与的反应,提示Pin1是VSMC衰老调节机制中的关键因子。同时,该研究可能提供了一个调控动脉粥样硬化病理过程的新靶点。
- 梁卫吕磊王鹏张雪袁凯李茂然张纪蔚孟秋蓉
- 关键词：动脉粥样硬化血管平滑肌细胞衰老
- 慢病毒介导Yes相关蛋白基因过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞增殖
- 2017年
- 目的探讨慢病毒介导Yes相关蛋白（YAP）过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞（miPSC-EC）增殖的机制。方法诱导小鼠诱导性多能干细胞（miPSC）为内皮细胞（EC），慢病毒介导质粒pPGK-2Flag-YAP转染miPSC-EC，嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株miPSC-EC/YAP。Western blot验证YAP是否成功转染miPSC-EC，并检测转染YAP后miPSC-EC内人第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）等蛋白的表达，同时应用噻唑蓝（MTT）比色法检测YAP对miPSC-EC增殖的影响。结果miPSC诱导分化所得细胞形态符合EC特征，几乎都表达EC标志血小板内皮细胞黏附分子（CD31）。Western blot结果显示，转染YAP的miPSC-EC中YAP高表达（未转染细胞YAP几乎不表达），miPSC-EC/YAP组较未转染组PTEN相对表达量明显降低（0.635±0.017比0.879±0.034, P=0.023），p-Akt/相对表达量显著升高（0.450±0.025比0.073±0.018, P=0.007）。同步化之后24、48、72 h，miPSC-EC/YAP组吸光度（A）值较未转染组显著增加（0.113±0.004比0.077±0.004，P=0.000；0.368±0.010比0.199±0.006，P=0.000；0.716±0.004比0.418±0.018，P=0.000）。结论成功诱导miPSC为EC，建立过表达YAP的细胞株miPSC-EC/YAP。过表达YAP抑制PTEN的表达，提高Akt磷酸化。YAP可能通过参与磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路促进miPSC-EC的增殖。
- 张雪郝长宁严泽振陈佳全吴圣俊曾庆坛阚科佳张岚
- 关键词：诱导性多能干细胞内皮细胞
- 诱导性多能干细胞在治疗性血管新生方面的研究进展被引量：1
- 2016年
- 下肢动脉硬化闭塞症（arteHosclerosis obliterans，ASO）是老年人常见的血管疾病。欧美国家70岁以上人群中的患病率为18．59％，我国60岁以上人群的患病率为16．42％。
- 张雪张岚
- 关键词：治疗性血管新生多能干细胞诱导性下肢动脉硬化闭塞症血管疾病
- 慢病毒介导的miPSC-EC YAP基因过表达及稳定感染细胞系的建立
- 张雪郝长宁曾庆坛阚科佳陈佳全吴圣俊严泽振张岚
- 诱导性多能干细胞的安全性及其在肝细胞再生方面的应用潜能被引量：2
- 2016年
- 2006年,Takahashi等1运用逆转录病毒将4个与胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）多能性密切相关的基因Oct-4、Sox2、c-Myc及Klf4导入到小鼠胚胎成纤维细胞和小鼠尾尖成纤维细胞中,成功将其重编程为具有ESCs多能性的细胞.
- 张雪明雅南张岚
- 关键词：肝细胞再生多能干细胞小鼠胚胎成纤维细胞安全性诱导性逆转录病毒
- 诱导性多能干细胞的安全性及其在肝细胞再生方面的应用潜能
- 张雪明雅南张岚
- 肽基脯氨酰异构酶Pin1在动脉粥样硬化的血管平滑肌细胞衰老中的作用被引量：4
- 2018年
- 目的探讨肽基脯氨酰异构酶(Pin1)调节动脉粥样硬化及血管平滑肌细胞(VSMCs)衰老的机制。方法收集正常及动脉粥样硬化病变的股动脉组织标本,并分别对其原代培养得到正常及动脉粥样硬化的VSMCs。运用免疫组化技术分别检测人体正常和动脉粥样硬化的股动脉组织中Pin1的表达;运用改良的TRAP法分别检测正常和动脉粥样硬化病变的股动脉组织中VSMCs的衰老情况;运用蛋白质印迹分析法检测VSMCs和过表达Pin1的动脉粥样硬化VSMCs中p Rb通路以及cyclin通路关键蛋白的表达。结果与正常情况相比,动脉粥样硬化股动脉组织中Pin1蛋白表达明显下调(P <0.05);动脉粥样硬化的VSMCs端粒酶活性被抑制(P <0.05);动脉粥样硬化的VSMCs中p-pRb的蛋白表达水平增加(P <0.05),Pin1及细胞周期蛋白B、D和E的表达水平明显下调(P <0.05)。反之,腺病毒介导的Pin1过表达下调p-pRb(P <0.05),上调细胞周期蛋白B、D和E(P <0.05)。结论 Pin1通过影响pRb通路以及cyclin通路调控VSMCs衰老,是VSMCs衰老调节机制中的关键因子,同时可能提供了一个调控动脉粥样硬化病理过程的新靶点。
- 张雪吕磊王鹏袁凯李茂然张纪蔚孟秋蓉梁卫
- 关键词：动脉粥样硬化血管平滑肌细胞衰老
- 诱导性多能干细胞在治疗性血管新生方面的研究进展
- 张雪张岚
- 慢病毒介导Yes相关蛋白基因过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞增殖的实验研究
- 张雪郝长宁严泽振陈佳全吴圣俊曾庆坛阚科佳张岚
- 慢病毒介导的miPSC-EC YAP基因过表达及稳定感染细胞系的建立
- 2016年
- 目的建立稳定过表达Yes相关蛋白(YAP)的小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞(miP SC-EC)系,为miP SC-EC过表达YAP基因的体内外实验研究奠定基础。方法将模板质粒(p CMV-Flag-YAP2-5SA)改建成慢病毒表达质粒(p PGK-2Flag-YAP2-Puro);将慢病毒表达质粒与包装质粒组成共包装系统转染293FT细胞;包装慢病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,测定滴度。诱导miP SC分化为EC,观察其形态特征,并行组织化学鉴定。包装好的慢病毒感染miP SC-EC,嘌呤霉素筛选稳定感染的细胞系miP SC-EC/YAP,并用RT-PCR及Western blot方法验证。结果慢病毒表达质粒(p PGK-2Flag-YAP2-Puro)构建成功,并成功包装YAP基因过表达慢病毒,滴度达到1.2×109 TU/ml。miP SC诱导分化所得细胞符合EC形态特征,几乎都表达EC标志CD31。转染YAP的miP SC-EC中YAP m RNA表达水平较未转染细胞明显升高,YAP蛋白高表达(未转染细胞中YAP蛋白几乎不表达)。结论成功构建YAP基因慢病毒过表达载体,诱导miP SC分化为EC,成功建立YAP基因稳定感染细胞系miP SC-EC/YAP。
- 张雪郝长宁曾庆坛阚科佳陈佳全吴圣俊严泽振张岚
- 关键词：慢病毒诱导性多能干细胞
