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LncRNA-GHET1过表达胃癌细胞株的构建与验证被引量：3: 2018年; 目的:构建与验证LncRNA-GHET1过表达的胃癌细胞株MGC803,观察LncRNA-GHET1在胃癌细胞株MGC803中表达情况。方法:从人胃癌细胞株MGC803中扩增出LncRNA-GHET1,将其克隆到pc DNA3. 1(-)载体上,构建真核表达载体pc DNA3. 1-GHET1;利用脂质体法将构建好的pc DNA3. 1-GHET1转染胃癌细胞株MGC803,并用G418筛选出LncRNA-GHET1稳定表达的细胞株;通过RT-qPCR验证筛选的细胞株。结果:经双酶切分析以及测序验证,成功构建真核表达载体pc DNA3. 1-GHET1; pc DNA3. 1-GHET1转染胃癌细胞株MGC803,转染效率达95%以上,经RT-qPCR验证,成功构建LncRNA-GHET1过表达稳定转染胃癌细胞株MGC803。结论:成功构建真核表达载体pc DNA3. 1-GHET1以及LncRNA-GHET1过表达稳定转染胃癌细胞株MGC803,为进一步研究LncRNA-GHET1基因在胃癌发生发展中的作用奠定基础。; 刘娟娟周春欢夏英赵娟娟万颖黄海; 关键词：长链非编码RNA 过表达胃肿瘤真核表达载体

长链非编码RNA SNHG16对胃癌细胞AGS增殖的影响被引量：5: 2018年; 目的:探讨长链非编码RNA SNHG16对胃癌细胞AGS增殖调控的影响。方法:AGS细胞分control组(正常培养的AGS细胞,C组)、negative control组(转染si-NC序列,NC组)及si-SNHG16组(转染si-SNHG16序列,SI组),通过siRNA干扰技术敲低lncRNA SNHG16后,采用逆转录-实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)验证AGS细胞中SNHG16的表达水平,CCK-8法检测敲低lncRNA SNHG16后AGS细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测AGS细胞周期的改变,Western blot检测AGS细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)及细胞周期蛋白依靠性激酶抑制剂家族成员p21蛋白表达水平的改变。结果:敲低lncRNA SNHG16后,与NC组相比,SI组中lncRNA SNHG16的表达显著降低(P <0. 01),细胞增殖能力受到明显抑制,细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞周期相关蛋白cyclin D1及CDK6表达下调,p21明显上调(P均<0. 01)。结论:敲低lncRNA SNHG16可能通过上调p21影响胃癌细胞AGS的增殖。; 刘娟娟周春欢赵娟娟夏英韦四喜黄海; 关键词：胃肿瘤长链非编码RNA 细胞增殖细胞周期蛋白

沉默HIF-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响被引量：3: 2017年; 目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:15只4~6周龄雌性裸鼠,随机均分为为HIF-1α干扰组、空载组及阴性对照组;采用脂质体转染法将HIF-1α的microRNA干扰质粒转染CNE-2细胞,RT-q PCR检测其沉默效应,将转染HIF-1α干扰质粒的CNE-2细胞、转染空载质粒的CNE-2细胞以及CNE-2细胞分别接种于3组裸鼠右腋皮下,建立鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型,形成肉眼可见的肿瘤后再喂养16 d,观察各组成瘤时间及肿瘤体积;RT-q PCR检测3组移植瘤中HIF-1α基因的表达,蛋白质印迹法检测3组移植瘤中HIF-1α蛋白的表达。结果:成功构建裸鼠移植瘤模型,HIF-1α干扰组、阴性对照组、空载组裸鼠成瘤时间分别为(8.60±1.40)、(4.60±0.55)、(4.80±0.84)d,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤体积分别为(128.60±77.70)、(1 411.10±212.50)、(1 306.80±154.60)mm3,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α干扰组瘤体组织中的HIF-1α基因和蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。结论:沉默HIF-1α基因能有效抑制人鼻咽癌裸鼠移植瘤成瘤时间和肿瘤的生长。; 向少龙赵艳刘娟娟赵厚育; 关键词：鼻咽肿瘤缺氧诱导因子-1Α 肿瘤移植

靶向沉默HIF-1α和Survivin基因对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响被引量：4: 2017年; 目的:探讨RNAi靶向沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和/或生存素(Survivin)基因对裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法:设计合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒,采用脂质体转染法将HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒转染到CNE-2细胞;取35只4~6周龄的雌性BALA/c裸鼠,随机均分为HIF-1α干扰组、Survivin干扰组、HIF-1α&Survivin干扰组(联合干扰组)、空载组和阴性对照组;分别给予相应转染后的CNE-2细胞注射至裸鼠右侧腋窝皮下,待各组裸鼠成瘤后,给予5Gy X-射线照射,每隔3 d放疗1次,共15Gy X-射线,观察各组裸鼠放疗前后的肿瘤体积,照射结束3 d后处死裸鼠,测量瘤体体积,计算肿瘤体积增加率;RT-q PCR法检测瘤体组织中的HIF-1α和Survivin mRNA表达水平,Western Blot法检测HIF-1α和Survivin蛋白表达水平,TUNEL试剂盒检测鼻咽癌裸鼠移植瘤中细胞凋亡。结果:HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组经过放射治疗后肿瘤体积增加率明显小于空载体组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平显著低于空载组与阴性对照组,细胞凋亡率高于空载组与阴性对照组(P<0.05);HIF-1α干扰组、Survivin干扰组及联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平及细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单独干扰HIF-1α、Survivin基因与联合干扰HIF-1α和Survivin基因均能够增加鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗敏感性,但联合干扰并没有进一步提高鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性。; 向少龙刘娟娟赵艳赵厚育; 关键词：缺氧诱导因子-1Α 生存素放疗敏感性

长链非编码RNA SNHG16对人胃癌细胞株AGS增殖、侵袭、凋亡的影响及机制探究: 目的:通过体外RNAi干扰技术敲低SNHG16表达,探讨其对胃癌细胞AGS增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期的影响及其作用机制,探索其作为胃癌治疗及预后靶点的可能性。方法:（1）通过阳离子脂质体Lipofectamine?...; 刘娟娟; 关键词：胃癌 SIRNA干扰细胞增殖; 文献传递

HIF-1a与VEGF在稽留流产绒毛组织中的表达及其意义: 目的：　　检测HIF-1α及VEGF分别在稽留流产与正常早孕绒毛组织中的表达情况，探寻它们的表达在稽留流产发生过程中的作用及相互联系。　　材料与方法：　　选取50例稽留流产患者的绒毛组织作为实验组，采用免疫组织化学技术检...; 刘娟娟; 关键词：稽留流产绒毛组织表皮生长因子受体; 文献传递

胃癌长链非编码RNA SNHG16异常表达及其临床病理意义被引量：16: 2017年; 目的:检测长链非编码RNA SNHG16在胃癌组织与癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:实时荧光定量PCR(quantitative real time-PCR,qRT-PCR)法检测SNHG16在41例胃癌组织及5株不同分化程度细胞系和胃黏膜上皮细胞中的表达情况,分析SNHG16表达与胃癌临床病理的相关性。结果:胃癌组织中SNHG16相对于癌旁组织其表达量为(2.64±1.59),表达显著上调且与胃癌侵袭相关(P<0.05,r=0.361)。与GES-1细胞株比较,HGC-27中SNHG16相对表达量为(4.21±0.69),MGC-803为(1.99±0.21),BGC-803为(1.90±0.44),SGC-7901为(0.76±0.05),AGS为(3.36±0.81);SNHG16在SGC-7901中低表达,但差异无统计学意义(P>0.05),在其他4株细胞中显著高表达(P<0.01)。结论:SNHG16在胃癌组织中高表达,且其表达水平与胃癌侵袭程度相关,可成为胃癌预后监测及治疗的靶点。; 赵娟娟韦四喜严芝强刘娟娟万颖黄海; 关键词：胃癌长链非编码RNA QRT-PCR

胃癌高表达转录本1对胃癌细胞株AGS增殖、周期的影响及其机制被引量：4: 2018年; 目的观察胃癌高表达转录本1(GHET1)对胃癌细胞株AGS增殖、周期的影响,并探讨其机制。方法将干扰序列si-GHET1、阴性对照序列si-NC、空白对照序列转染进AGS细胞中(分别计为干扰组、阴性组、空白组),采用real-time PCR法检测各组细胞GHET1,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Western blotting法检测细胞周期相关蛋白。结果干扰组、阴性组、空白组GHET1相对表达量分别为0.42±0.06、1、1.15±0.19,干扰组与其余两组比较,P均<0.05;48 h细胞OD450值分别为0.57±0.04、0.93±0.05、1.03±0.06,72 h细胞OD450值分别为0.69±0.10、1.54±0.08、1.58±0.14,干扰组与其余两组比较,P均<0.05;G0/G1期细胞比例分别为62.01%±4.56%、47.03%±3.36%、44.65%±3.44%,S期细胞比例分别为20.34%±3.29%、32.25%±1.78%、32.96%±2.58%,干扰组与其余两组比较,P均<0.05;CDK2相对表达量分别为0.60±0.08、0.81±0.07、0.81±0.02,CDK4相对表达量分别为0.57±0.03、0.89±0.08、0.87±0.06,CDK6相对表达量分别为0.62±0.09、0.86±0.07、0.92±0.07,Cyclin D相对表达量分别为0.58±0.03、0.74±0.02、0.70±0.04,Cyclin E相对表达量分别为0.33±0.03、0.39±0.01、0.39±0.01,干扰组与其余两组比较,P均<0.05。结论 GHET1可促进AGS细胞增殖,缩短细胞周期,其机制可能通过上调细胞周期相关蛋白表达来实现。; 万颖严芝强韦四喜夏英刘娟娟周春欢黄海; 关键词：胃癌长链非编码RNA 细胞周期细胞周期相关蛋白

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刘娟娟

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