王瀚
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 缺氧前、后处理1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞缺氧/复氧损伤拮抗作用的差异及相关机制被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨1-磷酸鞘氨醇（S1P）缺氧前、后处理对心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤拮抗作用的差异及相关机制。方法：分离SD乳鼠（1—2d龄）心肌细胞进行体外培养。对培养的心肌细胞进行H／R处理以模拟心脏缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，r／R）损伤。将培养的心肌细胞随机分为对照组、H／R组、H／R＋SIP缺氧前处理（H／R’pre—S1P）组及I-I／R＋SIP缺氧后处理（I-I／R＋post—S1P）组，采用四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyltetrazo｜ium。MTT）比色法检测心肌细胞的活力，乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase，LDH）检测试剂盒检测培养基中LDH的水平，caspase-3活性检测试剂盒检测心肌细胞中caspase．3的活性，Westernblot检测ATP激活的蛋白激酶（AMPK）、激活的苏氨酸激酶（Akt）、细胞外信号调节激酶1／2（ERKl／2）蛋白磷酸化水平及SIP裂解酶．1（SIPlyase1，SPLl）蛋白表达的水平。结果：与对照组相比，I-1／R组心肌细胞活力显著降低（P〈0．01），培养基中LDH的浓度和细胞中easpase-3的活性显著增高（P〈0．01）。S1P缺氧前处理可明显增加H／R处理后心肌细胞的活力（P〈0．01），减少LDH释放和caspase-3的活性（P〈0．01）；而I-I／R＋post—S1P组的各项指标与H／R组比较均无明显差异。Westernblot检测发现，S1P缺氧前处理可明显增高心肌细胞中AMPK、Akt和ERkl／2磷酸化的水平（P〈0．05），而SIP缺氧后处理未激活AMPK、Akt和ERKl／2生存信号。Westernblot检测发现，缺氧处理组心肌细胞中SPLl表达的水平较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：缺氧前用S1P处理可激活AMPK、Akt、ERKl／2生存信号，显著减少心肌细胞凋亡，增加细胞的存活率，减轻心肌细胞H／R损伤；而S1P缺氧后处理不能发挥以上保护作用，其机制可能是缺氧处理导致心肌细胞SPLl的表达上调，通过降解SIP而减弱了其介导�
- 张富洋周芬闫文俊王瀚陶凌
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇缺氧复氧损伤乳鼠
- 脂联素通过增强线粒体生物合成和功能减轻高糖/高脂诱导的心肌细胞损伤
- 2013年
- 目的:观察脂联素(APN)是否通过增强线粒体生物合成和功能减轻高糖/高脂所致心肌细胞损伤。方法:分离培养SD乳鼠的心肌细胞,培养3 d后分为3组:即对照组(培养基中含5 mmol/L葡萄糖和20 mmol/L甘露醇)、高糖/高脂组(培养基中含25 mmol/L葡萄糖和500μmol/L软脂酸钠,培养18 h)及高糖/高脂+APN组(培养基中含25 mmol/L葡萄糖,500μmol/L软脂酸钠和3μg/ml APN球状片段,培养18 h)。高糖/高脂处理后,检测转录因子Tfam mRNA的水平、细胞线粒体膜电位与心肌细胞的凋亡。结果:与对照组比较,高糖/高脂组Tfam mRNA的水平与线粒体膜电位均降低,细胞凋亡增加;APN处理可逆转上述作用。结论:高糖/高脂降低心肌线粒体生物合成和导致线粒体功能障碍;APN可通过增加线粒体的生物合成和功能而发挥对心肌保护的作用。
- 王瀚闫文俊周芬张立剑李文婷刘佩林陶凌
- 关键词：脂联素心肌细胞高糖高脂线粒体功能
- Nur77在缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用及其机制的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:观察Nur77通过线粒体转位对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法:原代培养l-2天SD大鼠心肌细胞,建立H/R模型。随机分为正常对照组、H/R组、Nur77组,采用免疫荧光检测横纹肌肌动蛋白(α-actin)鉴定心肌细胞;采用TUNEL染色法及Caspase-3酶活性检测心肌细胞凋亡情况;采用Western blot检测细胞核及线粒体Nur77蛋白表达、线粒体及胞浆Omi/HtrA2蛋白表达。结果:H/R组细胞核中Nur77蛋白表达明显低于正常对照组;而在线粒体中则相反。Nur77组线粒体中的Omi/HtrA2蛋白表达明显低于正常对照组;而在胞浆中则相反。结论:在心肌细胞H/R损伤时,Nur77线粒体转位促使Omi/HtrA2蛋白从线粒体释放入胞浆,从而导致心肌细胞凋亡。
- 贾敏刘静祎刘毅栗莉裴海峰刘佩林王瀚王海昌陶凌
- 关键词：OMI/HTRA2凋亡
