马延森
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院农业部动物生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生石油与天然气工程更多>>
- Luman-N端融合蛋白单克隆抗体的制备
- 2013年
- 【目的】制备小鼠抗Luman-N端融合蛋白单克隆抗体。【方法】将GST-Luman-N端载体转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳,用电洗脱的方法纯化融合蛋白;以纯化的融合蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,利用间接ELISA方法筛选阳性孔,采用有限稀释法进行亚克隆,筛选具有抗体分泌活性的单克隆细胞株;应用Western Blot、间接ELISA等方法进行克隆株稳定性、抗体特性的鉴定。【结果】获得1株能稳定分泌抗Luman-N端融合蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2C8),其腹水ELISA单抗效价为1∶1×107。亚型鉴定和亲和力常数分析表明,2C8产生的单克隆抗体亚型为IgG2b型,其亲和力常数约为1×107。Western Blot分析证明,该株单抗能与原核表达的Luman-N端融合蛋白特异性结合,与GST-LRF-N端融合蛋白没有特异性结合。染色体分析结果表明,2C8细胞株染色体数目为(53±2)对。【结论】获得了抗Luman-N端融合蛋白的抗体,该抗体具有良好的特异性和结合活性,可用于对Luman-N端蛋白的进一步研究。
- 兰向莉李晓马延森靳亚平
- 关键词：间接ELISA单克隆抗体
- 利用RNA干扰技术筛选调控果蝇中肠干细胞的基因
- 果蝇的中肠干细胞系统(ISC)是一种重要的成体干细胞研究模型。为了寻找参与调控果蝇中肠干细胞的基因，我们开展了一项大规模的体内遗传筛选实验。使用RNA干扰(RNAi)技术，选择性地在果蝇中肠干细胞中抑制靶基因的表达，通过...
- 马延森陈志靳亚平刘伟
- 关键词：RNAI
- 秦川牛Nrampl基因N端序列的原核表达及纯化
- 目的:为了研究牛天然免疫力相关巨噬细胞蛋白1(Nrampl)的功能，探寻转基因抗胞内感染菌牛新材料创制的功能基因.
方法:本试验使用BepiPred 1.Ob Server软件对Nrampl基酸序列分析后，应用...
- 李倩徐晓彬陈华涛王爱华张涌靳亚平马延森
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 文献传递
- 抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2单克隆抗体的制备
- 2013年
- 【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),进行诱导表达,通过GST亲和层析法纯化GST-Atac2融合蛋白。以GST-Atac2为抗原免疫8周龄的Balb/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株,检测抗体的特异性、效价和亚型,并检测其亲和常数。【结果】PCR扩增获得了目的片段。成功构建了GST-Atac2融合蛋白表达载体,于37℃下220r/min振摇5h,当IPTG终浓度为0.1mmol/L时,GST-Atac2在E.coli BL21(DE3)中高效表达,GST-Atac2融合蛋白大小约为30ku,与预期结果一致。获得1株稳定分泌抗Atac2抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C7。单抗1C7能够特异地识别GST-Atac2蛋白,效价为1∶2×105;亚型鉴定表明其重链为IgG1,所得单克隆抗体的亲和常数为2×105。【结论】获得了1株特异性好、能够稳定分泌抗果蝇Atac2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。
- 马延森李晓陈志兰向丽武小椿靳亚平刘伟
- 关键词：果蝇原核表达单克隆抗体
- Atac2调控肠道干细胞的机理研究及BHD综合症动物模型的建立
- 果蝇是一种经典的模式动物，在干细胞，以及动物生理和疾病等研究领域有着广泛的应用。本论文以果蝇为模式动物，开展了以下两项研究： (1)组蛋白乙酰转移酶Atac2调控肠道干细胞的机理研究 本论文以果蝇中肠为研究模型，通过体内...
- 马延森
- 关键词：果蝇肠道干细胞
- 文献传递
